來(lái)自美國(guó)能源部(DOE)西北太平洋國(guó)家實(shí)驗(yàn)室(Pacific NorthwestNationalLaboratory,PNNL)的研究人員發(fā)明了一種新型儀器能提高蛋白表達(dá)檢測(cè)的速度和質(zhì)量。這種蛋白質(zhì)譜儀(protein massspectrometer,PROMS)是開(kāi)發(fā)的第一個(gè)針對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)研究的高通量質(zhì)譜儀。這一質(zhì)譜儀由Richard D.Smith和他的同事從一種9.4特斯拉的傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀(Fourier Transform Ion CyclotronResonance Mass Spectrometer)改裝而來(lái)——這種共振質(zhì)譜儀是由BrukerDaltonics(布魯克·道爾頓公司,著名的儀器公司)制造。
根據(jù)PNNL的報(bào)告,PROMS相比于其它MS,靈敏性高100多倍,速度也要快10-100倍。這項(xiàng)新的設(shè)計(jì)集合了Smith和他的團(tuán)隊(duì)的一項(xiàng)發(fā)明:在MS上應(yīng)用動(dòng)力學(xué)范圍增長(zhǎng)(dynamicrange enhancement applied to massspectrometry,DREAMS)。這樣克服了MS同一時(shí)間能測(cè)量的分子數(shù)量限制障礙,利用DREAMS研究人員能排除最大,豐度最高的蛋白的影響,將精力集中在低水平蛋白上。Smith表示,在生物過(guò)程中越是數(shù)量少,不常見(jiàn)的“player”越是起著重要的作用,就像細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中信號(hào)因子的作用。
PNNL研究人員利用這一系統(tǒng)檢測(cè)了一巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus)——已知引起視網(wǎng)膜炎癥,以及DOE感興趣的3個(gè)微生物。在 2002年利用PROMS,研究人員識(shí)別了耐輻射奇球菌(DeinococcusRadiodurans)中預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)組的1900多個(gè)蛋白(大約共 3,200個(gè),占61%)(M.S. Lipton et al.,"Global analysis of the Deinococcus radiodurans proteome by usingaccurate mass tags," Proceedings of the National Academy ofSciences, 99:11049-54, Aug. 20, 2002.),這項(xiàng)成果是當(dāng)時(shí)為止任何生物中覆蓋最廣的蛋白質(zhì)組分析結(jié)果。
Bruker公司副總裁,生命科學(xué)系統(tǒng)總經(jīng)理JohnWronka認(rèn)為PROMS技術(shù)是哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)組學(xué)以及“代謝體學(xué)” (metabolomics)——一個(gè)全新的代謝研究而準(zhǔn)備的一門(mén)技術(shù),目前PerkinElmer,Bruker等公司都有PROMS儀器,其中PEI 的蛋白組學(xué)質(zhì)譜樣品預(yù)制工作站特點(diǎn)包括:
全自動(dòng)密封系統(tǒng),杜絕手工操作和環(huán)境引入的外來(lái)污染,保證樣品回收率和重現(xiàn)性。
全自動(dòng)完成樣品脫鹽、濃縮和汛積至MALDl tarqet過(guò)程。
精密的液體處理系統(tǒng)可精確控制樣品的吸附和解吸動(dòng)力學(xué)過(guò)程,提高樣品回收率和重現(xiàn)性,并保證質(zhì)譜檢測(cè)的靈敏度。
一次處理96個(gè)樣品。
靈敏度: 200fmoI BSA。
可使用Millipore Zip Tip或Amika ProTip。
兼容所有常用MALDl targets。