近日，賽業(yè)生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球?qū)＠夹g(shù)TetraOne^TM KO，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個(gè)月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脫靶效應(yīng)困擾的革命性技術(shù)。TetraOne^TM KO的出現(xiàn)，是ES打靶技術(shù)制備基因敲除鼠的一個(gè)重大突破。

 

 

      傳統(tǒng)ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因組編輯的三大技術(shù)及主要工具。新一代核酸酶基因編輯技術(shù)TALEN和CRISPR/Cas9作為現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)上的一次革新，它結(jié)合了轉(zhuǎn)基因技術(shù)簡(jiǎn)便快速，沒有物種限制及ES細(xì)胞基因打靶技術(shù)精準(zhǔn)的優(yōu)點(diǎn)，在短短的幾年時(shí)間里便受到廣大科研人員的青睞。但由于其脫靶效應(yīng)至今無法避免，且難以勝任大片段的基因敲入，所以還遠(yuǎn)遠(yuǎn)談不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脫靶效應(yīng)將是未來的主要研究方向。

基于同源重組的ES打靶是基因敲除的業(yè)內(nèi)金標(biāo)準(zhǔn)，它通過同源重組技術(shù)將外源基因定點(diǎn)整合入靶細(xì)胞基因組上某一確定的位點(diǎn)，以達(dá)到定點(diǎn)修飾改造基因組某一基因的目的?；虼虬屑夹g(shù)目前已被廣泛認(rèn)為是一種理想的特定修飾與改造生物體遺傳物質(zhì)的最佳方法。尤其是條件性和誘導(dǎo)性基因打靶系統(tǒng)的建立，使得對(duì)基因在時(shí)間和空間上的靶位修飾更加明確、效果更加精確可靠。盡管如此，漫長(zhǎng)的構(gòu)建周期（需時(shí)8-12個(gè)月）卻使很多研究者望而卻步。

      很明顯，TALEN、CIRSPR/Cas9和傳統(tǒng)ES打靶基因敲除技術(shù)有著互補(bǔ)的作用，而TetraOne^TM KO技術(shù)卻是兩者優(yōu)勢(shì)的結(jié)合。這在目前基因組編輯的技術(shù)研究中，無疑是最為值得關(guān)注的新一代革命性技術(shù)。它使更加快速精準(zhǔn)構(gòu)建基因打靶小鼠成為可能。

 

 

    賽業(yè)生物科技采用獨(dú)特的建系和基因改造技術(shù)建立了具有遺傳優(yōu)勢(shì)的TetraOne^TM ES細(xì)胞系，通過在胚胎發(fā)育前期進(jìn)行顯微注射，使TetraOne^TM ES細(xì)胞100%代替內(nèi)源ES細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)跨越“嵌合體”階段從而一步直接獲得TetraOne^TM小鼠的基因打靶專利技術(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，TetraOne^TM小鼠的特征均與傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)產(chǎn)生的F1代小鼠一致。

 

 

     賽業(yè)生物提供利用TetraOne^TM KO技術(shù)構(gòu)建的完全性基因敲除小鼠、條件性基因敲除小鼠及定點(diǎn)敲入小鼠的技術(shù)服務(wù)。其構(gòu)建流程直接跨越了嵌合體階段，實(shí)現(xiàn)6個(gè)月完成構(gòu)建的極速周期：