我在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作, 每次講這個(gè)都能體會(huì)老年人教導(dǎo)年輕人人生經(jīng)驗(yàn)時(shí)候的心情。眼看著年輕人要重蹈覆轍,可就是不聽(tīng)老夫用血淚換來(lái)的人生經(jīng)驗(yàn),也罷,年輕人是有資本走彎路的。 下面講講本人總結(jié)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)五個(gè)原則。
原則一:先讀Protocol。
專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)叫做RTFM:Read The Fucking Manual。
商業(yè)化的試劑都有成熟的Protocol,在第一次使用之前,先把自己腦子里關(guān)于這個(gè)產(chǎn)品的知識(shí)全扔掉,認(rèn)真讀一次Protocol,注意我說(shuō)的是認(rèn)真讀,一字一字讀。按照Protocol說(shuō)的做,不要相信自己過(guò)往的經(jīng)驗(yàn)。
原則二:設(shè)置盡量多和全面的對(duì)照組。
沒(méi)有對(duì)照的實(shí)驗(yàn)不能得到結(jié)論,做了沒(méi)有意義。尤其是出錯(cuò)的時(shí)候,如果沒(méi)有對(duì)照組,是不可能找到原因的,因?yàn)樽兞刻嗔耍P(guān)于這一點(diǎn),后面會(huì)詳細(xì)講講。
原則三:試劑別公用。
不要和別人公用試劑,而是分裝成小份分給每個(gè)人,分給自己的就不要讓別人用,分給別人的自己就不要用。尤其是在人多擁擠的實(shí)驗(yàn)室。
另外只有自己用的試劑也分裝成小份用。
原則四:買(mǎi)貴的東西,省著用。
比買(mǎi)便宜的東西隨便用要更省錢(qián)。其實(shí)省錢(qián)倒是次要的,關(guān)鍵是便宜的東西有隱患。
很多試劑的成本之所以便宜,是因?yàn)槿鄙倭松a(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制(QC)環(huán)節(jié),導(dǎo)致不同批次產(chǎn)品之間性能的不穩(wěn)定性,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定對(duì)于辛辛苦苦做實(shí)驗(yàn)想發(fā)文章的研究生來(lái)說(shuō)是災(zāi)難性的。
原則五:在整個(gè)流程中設(shè)置關(guān)鍵的檢查點(diǎn),檢查點(diǎn)沒(méi)有通過(guò)之前不要進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
除非你對(duì)通過(guò)這個(gè)檢查點(diǎn)非常有信心,否則不要著急。這種趕進(jìn)度經(jīng)常會(huì)讓實(shí)驗(yàn)更慢。
講完了五個(gè)原則, 講講這背后的邏輯。
其實(shí)本質(zhì)上就是因?yàn)榉肿由飳W(xué)的實(shí)驗(yàn)(也包括很多生物學(xué)實(shí)驗(yàn))要操作的對(duì)象是不可見(jiàn)的,一步操作的結(jié)果并不能直接看到,而生物實(shí)驗(yàn)又往往存在非常多的變量。如果不注意一些原則的話,出了問(wèn)題永遠(yuǎn)找不到原因。
所以所有的原則都是盡量減少變量,才能避免失敗,使得到的結(jié)果具有說(shuō)服力。
生物學(xué)是個(gè)實(shí)驗(yàn)學(xué)科,Protocol其實(shí)就是前人總結(jié)的經(jīng)驗(yàn),按照這樣的經(jīng)驗(yàn)做,就能保證實(shí)驗(yàn)方法沒(méi)有問(wèn)題,也就減少了很多可能出現(xiàn)的變量(不確定因素),是為原則一。
原則二是為了在出現(xiàn)問(wèn)題的時(shí)候縮小Debug的范圍,從而減少變量。
原則三是避免別人的操作產(chǎn)生的變量,這種變量永遠(yuǎn)沒(méi)法控制。
原則四避免了無(wú)良商家引入的變量,減小了批次不穩(wěn)定性。
原則五是為了避免可能的變量積累導(dǎo)致的失敗。
類(lèi)比一下做生物實(shí)驗(yàn)和寫(xiě)程序。
程序?qū)懲曛笸ǔR膊皇且淮瓮ㄟ^(guò)的,經(jīng)常會(huì)有Debug的過(guò)程。好在Debug的過(guò)程中會(huì)告訴程序員哪些地方有問(wèn)題,一共有多少個(gè)。并且程序運(yùn)行一遍的時(shí)間通常很短。
對(duì)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),也需要經(jīng)歷Debug的過(guò)程。但是和程序Debug相比就太痛苦了。
首先實(shí)驗(yàn)操作的對(duì)象經(jīng)常是無(wú)法看到的,只能通過(guò)間接的方法檢測(cè)到,而且實(shí)驗(yàn)出Bug了永遠(yuǎn)不會(huì)有什么Debug程序告訴你哪些地方有問(wèn)題,一共有多少個(gè)。出了問(wèn)題只能自己試。其次實(shí)驗(yàn)周期通常比較長(zhǎng),分子實(shí)驗(yàn)還算好的,3-5天就差不多了,有很多實(shí)驗(yàn)周期是以年計(jì)的。
這時(shí)候,盡量減少各種奇葩的因素引入的變量就至關(guān)重要了。